Ácidos Nucléicos recombinantes en la naturaleza-ADN recombinante artificial

 

EJEMPLO DE ACIDOS NUCLEICOS RECOMBINANTES EN LA NATURALEZA

Considerándose como fuente fundamental de variabilidad genética, permitiéndonos el intercambio de material genético entre ambos fragmentos dando lugar a una información génetica nueva y firme.

Recombinación homóloga de ADN: durante la reproducción sexual el entrecruzamiento durante la meiosis I intercambia ADN de cada cromosoma materno con el ADN homólogo del cromosoma paterno, posterior a esto los cromosomas contienen nuevas combinaciones de alelos.(1)

EJEMPLO DE ADN RECOMBINATE ARTIFICIAL

T:  Protective Immunity and New Vaccines for Lyme Disease-Vacunas contra la borreliosis de Lyme constituidas por OspA recombinante

O: Facilitar información actualizada acerca de Borrelia burgdorferi para la creacion de vacunas

G: ARNr, flaA, recA y p66, y genes plasmídicos como ospA

ER:  Enzima no especificada

EL: Ligasa T4

V: Vector fago M13- BAC

CR:  Procariotas (células bacterianas)

MGT: Tranformacion

MIC: Cultivo celular, Inoculación de la vacuna ,PCR (2)(3)

IMAGEN 
1.-https://royalsocietypublishing.org/doi/10.1098/rspb.2017.2706

2.-https://patentimages.storage.googleapis.com/71/9a/46/f7c47821966b14/ES2298249T3.pdf

3.-https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC7155782/

Una técnica de secuenciación o una técnica de hibridación del Cáncer de mama

OBJETIVO: 

El objetivo fue  obtener que porcentaje  de casos diagnosticados por IHC como HER2 2+ llegan a amplificar el gen por FISH y analizar si existe asociación con factores clinicopatologicos.

PROCEDIMIENTO :

El FISH se realizó utilizando el kit Pharm DXTM y los resultados fueron evaluados según los rangos establecidos para la proporción de sondas HER2 sobre sondas del cromosoma 17 tomando como negativos (menos de 1.8), positivos (mayores de 2.2) o ambiguos (de 1.8 a 2.2)

La amplificación del gen HER2/neu se observó en 41% del total de casos. 

En estos, se observó con mayor frecuencia un grado histológico III (66%), compromiso ganglionar presente (61%), tamaño tumoral ≥ 2 cm (86%) y Ki 67 ≥ 20% (83%).

CONCLUSION 

En casos ambiguos  la amplificación del gen HER2/neu está asociado a una edad ≥ 50 años y grado histológico III.

http://www.scielo.org.pe/scielo.php?pid=S1025-55832017000400002&script=sci_arttext&tlng=en

Prueba PCR en Cáncer de mama

 TEMA: Prevalencia de los polimorfismos de nucleótido único arg574pro del gen mmp-9 y ala38val del gen mmp-11 en pacientes con cáncer de mama

Objetivo: analizar los SNPs Arg574Pro (rs2250889) del gen MMP-9 y Ala38Val (rs738792) del MMP-11, con relación a las metástasis del cáncer de mama.

Tipo de muestra: ADN extraído de muestras obtenidas por punción venosa

Genes amplificados: GEN MMP-9 Y MMP-11

PCR: RFLP-PCR

Pasos: 

Visualización: 

Amplificación de los fragmentos de los genes MMP-9 y MMP-11

Amplificación con la 2ª combinación de los cebadores para MMP9

Referencias bibliográficas:

1. https://docs.bvsalud.org/biblioref/2018/08/909368/oncologia-clinica-vol-22-numero-3_89-95.pdf

Alteraciones de la epigenómica en el cáncer de mama

 En el cáncer de mama un gran número de genes supresores tumorales están silenciados por hipermetilación (adición excesiva de un grupo metilo a una molécula), como los genes implicados en la proliferación celular (BRCA1, ESR1 -REα -, PGR -RP-, RASSF1A, NES1, RARβ, p16, GSTP1), la adhesión e invasión (CDH1 -E-cadherina-, TIMP3), la apoptosis (TWIST) y la angiogenesis (MASPINA), entre otros. Además, las modificaciones postraduccionales de las histonas sufren alteraciones aunque los mecanismos epigenéticos responsables en los perfiles de histonas siguen siendo desconocidos.

BIBLIOGRAFIA

1.https://ddd.uab.cat/record/166106

2.Imagen 1

Alteración de la traducción en el Cáncer de Mama

La complementariedad entre los miARNs y sus ARNm diana determina el mecanismo inhibidor de la traducción de las proteínas, causando diferentes niveles de producción de las mismas, el complemento perfecto entre los miARN y sus ARNm diana induce la degradación del ARNm, y el emparejamiento parcialmente complementario de bases entre los miARNsr y ARNm, resulta en represión o inhibición parcial de la traducción de proteínas. Por lo tanto, la pérdida de la regulación de un solo miARN desencadena cáncer de mama, entre otras enfermedades. 
Los microARNs (moléculas cortas de ARN monocatenario) son reguladores postranscripcionales clave de la expresión génica, pueden regular innumerables vías celulares y de señalización.(1)

REFERENCIAS

 - Imagen 1 

- 1.	Alonso ABM. Papel de los miARNs en el cáncer de mama en general. [Online].; 2020 [cited 2021 Junio 27. Available from: https://repositorio.unican.es/xmlui/bitstream/handle/10902/19433/MARTINEZ%20ALONSO%2c%20AIDA%20BAIZAN.pdf?sequence=1&isAllowed=y.

Alteración de transcripción en el cáncer de mama

 Para que la transcripción se produzca correctamente el reclutamiento de la RNApol debe de realizarse en un tiempo y espacio adecuado a través de los factores de transcripción. (1) Las alteraciones en estos procesos pueden desembocar un aumento o una disminución en la expresión de genes, es muy importante nombrar que existen factores específicos y secuencias de cis que unen a la región promotora  actuando coordinadamente para llevar a cabo este proceso de transcripción. En el caso del promotor BRCA2,6 microdelecciones se disminuye la trascripción y 3 la aumenta , estas variaciones alteran secuencias de unión a los factores de transcripción NFYA y PAX5.(2)

Referencias bibliográficas.- 

* Pérez Moreno EV. Repositorio.uc. [Online].; 2020 [cited 2021 Junio 20. Available from: https://repositorio.uc.cl/handle/11534/28865.

* Fraile-Bethencourt E. DIGITAL.CSIC. [Online].; 2018 [cited 2021 Junio 20. Available from: https://digital.csic.es/handle/10261/197979. * Imagen 1

ALTERACIONES DEL GENOMA EN EL CANCER DE MAMA

La mayoría de casos del cáncer de mama se encuentra asociada a los genes BRCA1 y BRCA2 los cuales tienen un patrón de herencia autosómica. Las mutaciones de BRCA2 es de inserciones o de delecciones de pequeños números de pare de cromosomas de bases que forman el ADN en el gen y al no ser normales  no se dará la reparación de errores en la doble hebra de ADN. las mutaciones del gen BRCA1  dada en el brazo q del cromosoma 17 ,provoca la aparición de un cordón de parada prematuro , la deleción de los 10 últimos aminoácidos de la proteína BRCA 1 quien es suficiente para abolir su capacidad de inhibir el crecimiento tumoral , este daño consiste en pequeñas inserciones o delecciones en la secuencia del ADN

Los genes HRAS1,PTEN,Tp53,CHK2 y ATM  pueden ser implicados en estas alteraciones genómicas del cáncer de mama. (1)

Recuperado por :https://www.youtube.com/watch?v=EW6NG5Gursk

Referencias Bibliograficas

1.	Fernández T. Á, Reigosa Y. A. Cáncer de mama hereditario. Comunidad y Salud. 2016 Julio; 14(1).